武漢英科生物技術有限公司開發的河豚毒素ELISA檢測試劑盒，檢測限量達到2 ppb,在美國、日本、俄羅斯、北歐等食品企業、政府檢驗機構廣為應用，質量合格率達到100%誤差1%左右，大量的實驗數據表明，河豚毒素檢測試劑盒技術水平國際一流水平。

       與LC-MS儀器對比試驗，結果符合率100%批間差異小于0.1%<,試劑盒穩定高，抗干擾力強。

1.  ELISA標準工作曲線

      按照競爭性ELISA操作過程，對不同稀釋度的河豚毒素標準液進行測定，以各孔平均OD值與對照組的OD值比值的logit函數為縱坐標，以不同濃度河豚毒素標準品濃度的對數為橫坐標，繪制出標準曲線。結果如圖所示：線性回歸方程為y＝-1.9695x＋3.3899，R2＝0.9902；線性范圍為5-500 ng/mL，最低檢測限為5 ng/mL。

圖1  ELISA標準工作曲線（縱坐標不是抵制率logit(B/B0)）

2.   回收率實驗

      添加250 ng和500 ng的河豚毒素標準品的1 g河豚魚魚肉中，通過競爭性ELISA檢測結果如表所示：添加250 ng標準品時，回收率為159%，添加500 ng標準品時，回收率為108%。產品回收率偏高，我們分析可能是由于洗板次數太多，導致少量的抗體抗原脫離，或者是由于實驗時間偏長，抗體的效價減弱引起。產品回收率偏高，不影響檢測靈敏度，由于產品檢測限較低(5 ng/mL)，所以該產品可以滿足日常對河豚魚的檢測工作要求。

4.   樣品中河豚毒素的檢測

         方法依據：GBT 5009.206-2007 鮮河豚魚中河豚毒素的測定

         m:檢測樣品的質量，單位為克（g）

       關于河豚魚的毒性,一般分為4個毒力等級:毒性高于1000 MU/g為劇毒級;介于100 MU/g～1000 MU/g之間為強毒級;介于10 MU/g～100 MU/g之間為弱毒級;低于10 MU/g為無毒級(無毒級中使小鼠致死的情況可視為微毒級)。據張理對鼠單位的定義 (1 MU=0.22 μg)。